细菌染色液的具体操作步骤：
1、涂片 a、取一块干净的载玻片，平放，在载玻片中央滴一小滴生理盐水。 b、用接种环无菌操作从琼脂斜面上挑取适量菌苔。 c、将挑取的菌苔沾入载玻片中央生理盐水中混匀并涂成薄膜。
2、干燥 将涂好菌膜的载玻片平放在室温下自然干燥。也可用电吹风低温吹干。
3、固定 手持(木夹夹住)已干燥的涂有菌膜的载玻片，涂面朝上，在酒精灯火焰上通过2~3次。 原理：加热使细菌细胞的蛋白质凝固，从而固定细菌细胞形态，巴氏染色液原理，并使之牢固附着在载玻片上。
4、染色 将热固定的细菌涂片平放于在载玻片架上，滴加染液于涂片上。 染色时间：吕氏碱性美蓝染色1~2min;复红染色约1min;草酸铵结晶紫染色约1min。
5、水洗 将细菌涂片上染液倒入废液缸中；手持细菌染色涂片，置于废液缸上方，用洗瓶中自来水冲洗涂片，巴氏染色液配置，直至流下的水无色为止。
6、干燥 自然干燥：平放于室温，自然干燥。 吹干：用电吹风冷风或低温热风吹干。 吸干：平放在一张吸水纸上，上面覆盖一张吸水纸，湖北巴氏染色液，将细菌涂片两面水分吸干。
DAB染色液的使用方法：
1.DAB显色液配制 10mMTris-HCl(pH7.6)9mL DAB(diaminobezidin3，3-胺) 0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL，显色时加入5-10mL30%H2O2混匀后立即使用。
2.显色 准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗（或生物素）处理、辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步骤。
3.加入适量的DAB显色液，铺满整个固相膜表面（可按比例增减）。
4.置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2至5分钟，避免光照（暗室操作），巴氏染色液采购，直至棕褐色沉淀出现。
5.用镊子夹起固相膜，放进无离子水里清洗。
6.空气中晾干。
7.拍照记录。
巴氏染色液【检验结果的解释】脱落细胞染色后，细胞核呈紫色，非角质化细胞的细胞质呈蓝色或淡绿色，角质化细胞的细胞质呈粉红色或橘红色。粘液呈淡蓝色或粉红色。
【检验方法的局限性】仅供形态学初检观察染色使用。
巴氏染色液【产品性能指标】
1、外观：密封性良好，无漏液。
2、染色效果：脱落细胞染色后，细胞核呈紫色，细胞质因分化成度不同，被染后呈现蓝色、淡绿色、粉红色或橘红色。粘液呈淡蓝色或粉红色。
3、稳定性：试剂盒在37℃恒温箱中连续放置7天以上，仍能保持外观和染色效果。
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